2. 诱导疾病模型产品 Others
  3. 免疫与炎症疾病模型 Fluorescent Dye
  4. 半抗原
  5. FITC

FITC  (Synonyms: 异硫氰酸荧光素酯; Fluorescein 5-isothiocyanate)

目录号: HY-66019 纯度: 98.60%
COA 产品使用指南

摩尔计算器

FITC，英文全称 Fluorescein Isothiocyanate，中文名称异硫氰酸荧光素，是生物学中应用最为广泛的一种绿色荧光素衍生物。FITC 具有高吸收率和优良的荧光量子产率等特点。FITC 的异硫氰酸基团可与蛋白质上的氨基、巯基、咪唑、酪氨酰、羰基等基团相结合，从而实现包括抗体，凝集素在内的蛋白标记。FITC 除了用作蛋白质标记物，还可用作蛋白质荧光示踪剂，通过标记抗体而快速鉴定病原体，或是用于蛋白质和多肽（HPLC）的微量测序。FITC 的最大激发波长为 494 nm。一旦激发，在最大发射波长 520 nm 处呈黄-绿色荧光。此外，FITC 也是一种能诱发接触超敏反应 (CHS) 的半抗原，并诱导特应性皮炎模型。

MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务

FITC Chemical Structure

FITC Chemical Structure

CAS No. : 3326-32-7

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2.  同一机构（单位）同一产品试用装仅限申领一次，同一机构（单位）一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户。

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500 mg ￥990
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1 g ￥1683
In-stock
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FITC 相关抗体

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MCE 顾客使用本产品发表的 44 篇科研文献

IF

    FITC purchased from MCE. Usage Cited in: Adv Sci (Weinh). 2022 Jan 20;e2104344.  [Abstract]

    For detection of localization of WBC100 in cells, FITC labeled WBC100 (WBC100‐FITC) is used. HEK293T cells are transfected with the indicated plasmids for 48 h. Cells are treated with 1 μM WBC100‐FITC or FITC for 24 h.

    FITC purchased from MCE. Usage Cited in: J Nanobiotechnology. 2022 Feb 2;20(1):61.  [Abstract]

    To exam the ability of anti-PD-L1 antibodies (aPD-L1) nanovesicles to binding to tumor cells, B16F10 cells are cultured for 24 h. FITC-labeled aPD-L1 nanovesicles or nanovesicles are incubated with the cancer cells for 3 h.

    FITC purchased from MCE. Usage Cited in: Nat Commun. 2021 Nov 5;12(1):6426.  [Abstract]

    Cinnamate acetate (CIA) is labeled with FITC. Distribution of CIA/FITC in root cells of wild-type, ala7 mutant and complemented Arabidopsis seedlings. The seedlings are treated with CIA/FITC (5 μg/mL) and FM4-64 (8 μM) for 1 h, 2 h, and 8 h.

    FITC purchased from MCE. Usage Cited in: ACS Nano. 2020 Nov 24;14(11):14907-14918.  [Abstract]

    FITC-labeled MnO2/BPD are added at a concentration of 50 μg/mL and incubated for another 4 h to allow the nanoparticles to enter the cells. By conjugating FITC to MnO2/BPD, FL could be monitored at 488 nm, and the vessels could be observed at 660 nm by Evans Blue staining.

    FITC purchased from MCE. Usage Cited in: Chem Eng J. 2020, 127870.

    FITC (1 mg/mL) solution is prepared with dimethyl sulfoxide. Then FITC solution is added dropwise into laccase (5 mg/mL) solution, and the mixed solution is then stirred at 4 °C for 4 h. Laccase is labelled by FITC and exhibited green emissions.

    • 生物活性

    • 实验参考方法

    • 纯度 & 产品资料

    • 参考文献

    生物活性

    FITC (Fluorescein Isothiocyanate), is one of the green fluorescein derivatives widely used in biology. FITC has the characteristics of high absorptivity and excellent fluorescence quantum yield. The isothiocyanate group of FITC can be combined with amino, sulfhydryl, imidazole, tyrosyl, carbonyl and other groups on the protein, so as to achieve protein labeling including antibodies and lectins. In addition to its use as a protein marker, FITC can also be used as a fluorescent protein tracer to rapidly identify pathogens by labeling antibodies, or for microsequencing of proteins and peptides (HPLC). The maximum excitation wavelength of FITC is 494 nm. Once excited, it fluoresces yellow-green at a maximum emission wavelength of 520 nm. In addition, FITC is also a hapten that can induce contact hypersensitivity (CHS) and induce an atopic dermatitis model[1][2][3][4].

    体外研究
    (In Vitro)

    原液制备

    1. 蛋白准备
    为了获得最佳标记效果，请将蛋白 (抗体) 浓度配制为 1 mg/mL。
    1) 蛋白溶液PH值应为 8.5±0.5，若 pH 低于 8.0，则用 1 M 碳酸氢钠进行调整。
    2) 若蛋白浓度低于 1 mg/mL，标记效率会大大降低，为了获得最佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为 1-10 mg/mL。
    3) 蛋白必须在不含伯胺 (如 Tris 或甘氨酸) 和铵离子的缓冲液中，否则会影响标记效率。
    2. 染料准备
    将无水二甲基亚砜加入 FITC 小瓶中，制成 10 mM 储备溶液，震荡摇匀。
    注：FITC 要现配现用，避光。
    3. 染料用量计算
    标记反应所需的 FITC 用量取决于要标记蛋白的用量，FITC 与蛋白的最佳质量比为 1：50 左右。
    例：假如所需标记蛋白为 1 mL，2 mg/mL 的 IgG (MW=150,000)，用 1 mL DMSO 溶解一管 1 mg FITC，则所需 FITC 体积为 40 μL。
    计算公式：
    Molar F/P=(MW/389)*(A495/195)/{[A280-(0.35*A495)]/E0.1%}=(A495*C)/[A280-(0.35*A495)]
    C=(MW*E0.1%280)/(389*195)
    注：
    C：一种蛋白质常数； MW：蛋白质分子量； 389：FITC 的分子量； 195：FITC 偶联物在 pH=13, 490 nm 处的吸光值 E0.1%； （0.35×A495）：基于 FITC A280 的校正因子； E0.1%：蛋白（1.0 mg/mL）在 280 nm 处的吸光值。

    使用说明
    1. 标记反应
    1) 取算好体积的新鲜配制的 50 μL FITC 缓慢加入到 1 mL 蛋白样品溶液中，轻轻摇匀混合，然后短暂离心将样品收集在反应管底部。切忌剧烈混匀，防止蛋白样品变性失活。
    2) 将该反应小管置于避光处，在室温条件下轻轻摇晃孵育 8 h，每隔 30 分钟，将反应小管轻轻颠倒几次，以充分混合两种反应物，提高标记效率。
    3) 加入 5 M 的 NH4Cl 至终浓度 50 mM，4℃ 终止反应 2 h。
    2. 蛋白纯化脱盐
    以下方案以使用 Sephadex G-25 柱纯化染料蛋白偶联物为例。
    1) 按照生产说明书制备 Sephadex G-25 柱。
    2) 将反应混合物装入Sephadex G-25 色谱柱顶部。
    3) 当样品运行到顶部树脂表面下方时，立即加入 PBS (pH 7.2-7.4)。
    4) 向所需样品中加入更多的PBS (pH 7.2-7.4)，完成柱纯化。结合物含有所需要的染料-蛋白质缀合物的组分。

    注意事项
    1. FITC 对光及湿度敏感。即用即配 FITC 溶液并丢弃未使用的部分。
    2. 低浓度的叠氮化钠 (≤3 mM 或 0.02％) 或硫柳汞 (≤0.02 mM 或 0.01％) 不会显著干扰蛋白标记；但是 20-50％ 的甘油会降低标记效率。
    3. 避免使用含伯胺 (例如 Tris，甘氨酸) 或铵离子的缓冲液，它们与待标记蛋白竞争反应。
    4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
    5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

    MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

    FITC 相关抗体:
    分子量

    389.38

    Formula

    C21H11NO5S
    CAS 号
    性状

    固体

    颜色

    Yellow to orange

    Emission (Em)

    525
    Excitation (Ex)

    488
    中文名称

    异硫氰酸荧光素酯；荧光素-5-异氰酸酯
    运输条件

    Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
    储存方式

    -20°C, protect from light, stored under nitrogen

    *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light, stored under nitrogen)

    溶解性数据
    细胞实验： 

    DMSO 中的溶解度 : 50 mg/mL (128.41 mM; 超声助溶; 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的 DMSO)

    H2O 中的溶解度 : < 0.1 mg/mL (insoluble)

    配制储备液
    浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
    1 mM 2.5682 mL 12.8409 mL 25.6819 mL
    5 mM 0.5136 mL 2.5682 mL 5.1364 mL
    查看完整储备液配制表

    * 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
    储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light, stored under nitrogen)。-80°C储存时，请在6个月内使用，-20°C储存时，请在1个月内使用。

    • 摩尔计算器

    • 稀释计算器

    Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

    质量
    =
    浓度
    ×
    体积
    ×
    分子量 *

    Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

    This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

    浓度 (start)

    C1

    ×
    体积 (start)

    V1

    =
    浓度 (final)

    C2

    ×
    体积 (final)

    V2

    动物实验：

    请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

    以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：
    ——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；
    以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

    • 方案 一

      请依序添加每种溶剂： 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

      Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (5.34 mM); 澄清溶液

      此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

      以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。

      生理盐水的配制：将 0.9 g 氯化钠，溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理盐水溶液。
    • 方案 二

      请依序添加每种溶剂： 10% DMSO    90% (20% SBE-β-CD in Saline)

      Solubility: 2.08 mg/mL (5.34 mM); 悬浊液; 超声助溶

      此方案可获得 2.08 mg/mL的均匀悬浊液，悬浊液可用于口服和腹腔注射。

      以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。

      20% SBE-β-CD in Saline 的配制（4°C，储存一周）：2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-环糊精）粉末定容于 10 mL 的生理盐水中，完全溶解至澄清透明。
    动物溶解方案计算器
    请输入动物实验的基本信息：

    给药剂量

    mg/kg

    动物的平均体重

    g

    每只动物的给药体积

    μL

    动物数量

    只
    由于实验过程有损耗，建议您多配一只动物的量
    请输入您的动物体内配方组成：
    %
    DMSO +
    % 
    +
    %
    Tween-80 +
    %
    Saline
    如果您的动物是免疫缺陷鼠或者体弱鼠，建议 DMSO 中的在最后工作液体系中的占比尽量不超过 2%。
    方案所需 助溶剂 包括：DMSO， ，均可在 MCE 网站选购。 ，Tween 80，均可在 MCE 网站选购。
    计算结果
    工作液所需浓度 : mg/mL
    储备液配制方法 : mg 药物溶于 μL  DMSO（母液浓度为 mg/mL）。

    *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light, stored under nitrogen)

    您所需的储备液浓度超过该产品的实测溶解度，以下方案仅供参考，如有需要，请与 MCE 中国技术支持联系。
    动物实验体内工作液的配制方法 : 取 μL DMSO 储备液，加入 μL 。 μL ，混合均匀至澄清，再加 μL Tween 80，混合均匀至澄清，再加 μL 生理盐水。
    连续给药周期超过半月以上，请谨慎选择该方案。
    请确保第一步储备液溶解至澄清状态，从左到右依次添加助溶剂。您可采用超声加热 （超声清洗仪，建议频次 20-40 kHz），涡旋吹打等方式辅助溶解。
    纯度 & 产品资料

    纯度: 98.60%

    COA (293 KB) RP-HPLC (244 KB) MS (68 KB)

    产品使用指南 (1538 KB)
    染色示例
    参考文献
    Cell Assay
    [1]

    The frequency of chondrocyte apoptosis is measured by flow cytometry with Annexin V-fluorescein isothiocyanate (FITC) and propidium iodide. A total of 1×104 treated chondrocytes are collected from each group, washed in cold PBS and incubated with Annexin V-FITC and PI at room temperature for 15 min in the dark on ice. These samples are then analyzed using a fluorescence-activated cell sorter. Cell Quest software is used to analyze the percentage of apoptosis. All tests are repeated in triplicate.

    MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
    参考文献

    FITC 相关分类

    完整储备液配制表

    * 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
    储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light, stored under nitrogen)。-80°C储存时，请在6个月内使用，-20°C储存时，请在1个月内使用。

    可选溶剂 浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
    DMSO 1 mM 2.5682 mL 12.8409 mL 25.6819 mL 64.2046 mL
    5 mM 0.5136 mL 2.5682 mL 5.1364 mL 12.8409 mL
    10 mM 0.2568 mL 1.2841 mL 2.5682 mL 6.4205 mL
    15 mM 0.1712 mL 0.8561 mL 1.7121 mL 4.2803 mL
    20 mM 0.1284 mL 0.6420 mL 1.2841 mL 3.2102 mL
    25 mM 0.1027 mL 0.5136 mL 1.0273 mL 2.5682 mL
    30 mM 0.0856 mL 0.4280 mL 0.8561 mL 2.1402 mL
    40 mM 0.0642 mL 0.3210 mL 0.6420 mL 1.6051 mL
    50 mM 0.0514 mL 0.2568 mL 0.5136 mL 1.2841 mL
    60 mM 0.0428 mL 0.2140 mL 0.4280 mL 1.0701 mL
    80 mM 0.0321 mL 0.1605 mL 0.3210 mL 0.8026 mL
    100 mM 0.0257 mL 0.1284 mL 0.2568 mL 0.6420 mL
    Help & FAQs
    • Do most proteins show cross-species activity?

      Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

    Keywords:

    FITC3326-32-7Fluorescein 5-isothiocyanate异硫氰酸荧光素酯荧光素-5-异氰酸酯Fluorescent DyeInhibitorinhibitorinhibit

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